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Exercices de chromatographie :


Correction exercice 16 :

1 - Le type de chromatographie utolisé ici est la chromatographie d'exclusion, ou tamisage moléculaire, gel filtration. (Faire un schéma).

2 - On peut tracer directement le nombre de cpm / ml en fonction du numéro des fractions, ou bien le nombre de cpm par fraction, en fonction du numéro des fractions (ce que l'on a fait ci-desous.


  • Le premier pic correspond à des composés exclus du gel, donc de haute masse moléculaire : la sonde radiomarquée.
     
  • Le second pic correspond à des composés retenus dans le maillage du gel d'exclusion : les nucléotides libres : le 32P dATP ainsi que le dCTP, le dGTP et le dTTP.
     
  • Les fractions 3, 4 et 5 sont mélangées afin de constituer la sonde.
3 - Rappel : le volume mort est le volume d'élution des composés dont le diamètre est supérieur à celui des pores du gel d'exclusion. Ici, cela correspond à la quatrième fraction. Le volume mort est donc de 400 microlitres.



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