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Exercices de chromatographie :


Correction exercice 2 :

1 - Cet exercice met en jeu une chromatographie échangeuse d'ions. Une résine polystyrénique substituée par des groupements sulfonate (-SO3-) est chargée négativement et est donc une résine échangeuse de cations.

Lorsque le pH est supérieur au pHi (pH > pHi), l'acide aminé est chargé négativement (forme anionique).

Lorsque le pH est inférieur au pHi (pH < pHi), l'acide aminé est chargé positivement (forme cationique).

Le tableau ci-dessous donne les charges des 3 acids aminés, à pH = 2 et à pH = 7.

acide aminé :

Acide L-Glutamique (Glu)
L-Leucine (Leu)
L-Lysine (Lys)
pHi :

3,22
5,98
9,74
charge à pH = 2 :

+
+
+
charge à pH = 7 :

-
-
+


Ainsi, à pH = 2, les trois acides aminés sont chargés positivement, et seront retenus lors du passage sur la colonne.

A pH = 7, seuls Glu et Leu, chargés négativement, seront élués. Lys reste fixé à la colonne.

Glu est élué en premier (pHi = 3,22) puis Leu l'est ensuite (pHi = 5,98).


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