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Exercices de chromatographie :


Correction exercice 7 :

Afin de remplir le tableau, il faut connaître quelques définitions :

- L'activité spécifique (AS) représente un nombre d'unités enzymatiques (UE) par gramme de protéines (g) :

AS = (UE / g)


- Le taux de purification d'une enzyme est le rapport de l'AS mesurée après une étape de purification, sur l'AS mesurée à l'étape précédente :

Taux de purification = AS après une étape / AS avant cette même étape


- Le rendement correspond à un nombre d'UE mesuré après une étape de purification, sur un nombre d'UE mesuré à l'étape précédente :

Rendement = UE après une étape / UE avant cette même étape


Connaissant ces définitions, on peut remplir le tableau. Il faudra rajouter une colonne supplémentaire "AS" qui nous permettra de calculer le taux de purification :


  protéine (g) : activité (UE) : AS : taux de purification : rendement :
Extrait brut 1000 20000 20 - -
Chromato. d'exclusion 200 14000 70 3,5 fois 70 %
Chromato. d'échange d'ions 15 4500 300 4,28 fois 32 %
Chromato. d'affinité 0,5 3500 7000 23,3 fois 77,7 %


On pourra utilement calculer :

- Le taux global de purification, qui est égal à l'AS mesurée à la fin de toutes les étapes, divisée par celle de départ. Ici, le taux global de purification est égal à 7000 / 20 = 350.

- Le rendement global qui est égal à 3500 / 20000 = 17,5 %,

Conclusion : Suite aux différentes étapes de purification, on a pu récupérer 3500 unités, sur les 20000 que l'on avait au départ, soit 17,5 %. L'enzyme a été purifiée 350 fois.



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