Correction exercice 7 :
Afin de remplir le tableau, il faut connaître quelques définitions :
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L'activité spécifique (AS) représente un nombre d'unités enzymatiques (UE) par gramme de protéines (g) :
AS = (UE / g)
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Le taux de purification d'une enzyme est le rapport de l'AS mesurée après une étape de purification, sur l'AS mesurée à l'étape précédente :
Taux de purification = AS après une étape / AS avant cette même étape
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Le rendement correspond à un nombre d'UE mesuré après une étape de purification, sur un nombre d'UE mesuré à l'étape précédente :
Rendement = UE après une étape / UE avant cette même étape
Connaissant ces définitions, on peut remplir le tableau. Il faudra rajouter une colonne supplémentaire "AS" qui nous permettra de calculer le taux de purification :
| |
protéine (g) : |
activité (UE) : |
AS : |
taux de purification : |
rendement : |
| Extrait brut |
1000 |
20000 |
20 |
- |
- |
| Chromato. d'exclusion |
200 |
14000 |
70 |
3,5 fois |
70 % |
| Chromato. d'échange d'ions |
15 |
4500 |
300 |
4,28 fois |
32 % |
| Chromato. d'affinité |
0,5 |
3500 |
7000 |
23,3 fois |
77,7 % |
On pourra utilement calculer :
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Le taux global de purification, qui est égal à l'AS mesurée à la fin de toutes les étapes, divisée par celle de départ. Ici, le taux global de purification est égal à 7000 / 20 = 350.
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Le rendement global qui est égal à 3500 / 20000 = 17,5 %,
Conclusion : Suite aux différentes étapes de purification, on a pu récupérer 3500 unités, sur les 20000 que l'on avait au départ, soit 17,5 %. L'enzyme a été purifiée 350 fois.
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