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Exercices de chromatographie :


Exercice 13 : Séparation des esters méthyliques d'acides gras.

L'estérification des acides gras d'un corps gras naturel (un mélange de triglycérides) peut être réalisée en incubant le corps gras avec du trifluorure de bore (catalyseur de la réaction) dans le méthanol (CH3-OH, donneur des groupements méthyls), à 100C durant 15 min.

Le chromatogramme ci-dessous représente le profil d'élution d'esters méthyliques d'acides gras saturés et insaturés repris dans l'hexane après injection en chromatographie en phase gazeuse. Le temps de rétention (tr) est indiqué en minutes, au-dessus de chaque pic :



tr : aire (%) :
8.98 30.783
17.16 15.976
19.00 29.293
22.90 14.636
29.32 8.761


Questions :

1 - Quel est le principe de la chromatographie utilisée ? Il existe deux techniques pour une telle chromatographie. Donnez en les principes en quelques lignes.

2 - Le standard interne est ici l'acide stéarique (C18:0) qui présente un temps de rétention de 17,16 minutes. A l'aide du tableau ci-dessous, déterminer la nature des autres acides gras élués. Que représente le premier pic (tr : 1,7 min) ? Selon quel(s) critère(s) les acides gras sont-ils élués ?

acide gras : rapport tr / tr C18:0 :
ac. laurique (C12:0) 0,12
ac. myristique (C14:0) 0,25
ac. palmitique (C16:0) 0,53
ac. stéarique (C18:0) 1
ac. oléique (C18:1 ; 9) 1,11
ac. linoléique (C18:2 ; 9, 12) 1,33
ac. linolénique (C18:3 ; 9, 12, 15) 1,71
ac. arachidique (C20:0) 1,88
ac. arachidonique (C20:4 ; 5, 8, 11, 14) 3,24


3 - Calculer la masse des différents produits dans l'échantillon, sachant que l'on a injecté 132 microgrammes d'esters méthyliques d'acides gras saturés et insaturés.



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