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Exercices de chromatographie :


Exercice 14 : Un corps gras naturel constitué d'un mélange de triglycérides (TG), est soumis à l'action de la lipase pancréatique. Cette enzyme permet l'hydrolyse des acides gras en position 1 et 3 des TG, ce qui mène à des acides gras libres (AGL) et des 2-monoglycérides (2-MG), lorsque la réaction est totale. Les AGL ont été purifiés à partir du lipolysat par chromatographie échangeuse d'anions. Cette chromatographie permet, outre la fraction AGL, de purifier une seconde fraction constituée de glycérides neutres (GN). Différents échantillons ont été analysés en chromatographie sur couche mince (gel de silice). Le mélange de solvant utilisé, de polarités différentes, étant : éther de pétrole / éther diéthylique.



Les dépôts effectués sont :

1 : Témoin Triglycérides (TG)
2 : Témoin 1, 2-Diglycérides et 1, 3-Diglycérides (DG)
3 : Témoin Monoglycérides (MG)
4 : Témoin Acides Gras
5 : Echantillon milieu de lipolyse
6 : Echantillon Fraction Glycérides Neutres (GN) provenant de la chromatographie échangeuse d'anions
7 : Echantillon Fraction Acides Gras Libres (AGL) provenant de la chromatographie échangeuse d'anions


Questions :

1 - Donner en quelques lignes le principe de la chromatographie sur couche mince utilisée. En fonction de quel(s) critère(s) les différents composés vont-ils être séparés ?

2 - Ecrire la réaction mettant en jeu les TG et la lipase pancréatique.

3 - Analyser le chromatogramme ci-dessus. Est-ce que la réaction de lipolyse est totale ?



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