Iodation du peptide neurotensine : Technique 3

La neurotensine (NT) est un neuropeptide de 13 acides aminés, pyroglutamylé au niveau du résidu d'acide glutamique 1, et de formule :

pGlu - Leu - Tyr³ - Glu - Asn - Lys - Pro - Arg - Arg - Pro - Tyr¹¹ - Ile - Leu¹³

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Technique 3 - Iodation de la NT par le réactif de Bolton-Hunter :


Cette troisième technique utilisée pour obtenir un analogue radiomarqué de la NT fait appel au réactif de Bolton-Hunter.



Rappel : Le réactif de BH réagit avec les amines en positions a et e.

Or la NT présente un résidu de lysine en position 6 :

pGlu - Leu - Tyr - Glu - Asn - Lys - Pro - Arg - Arg - Pro - Tyr - Ile - Leu¹³

S’il y a réaction au niveau de la Lys⁶ (réaction favorisée à pH 8,5) l'analogue obtenu perd un facteur 5 dans l’affinité pour les récepteurs de la NT. Il faut donc se débrouiller afin de ne pas toucher à celle lysine. Deux approches sont utilisées :

- Transformation du résidu pGlu¹ en Glu par une activité enzymatique de type pyroglutamyl aminopeptidase, ce qui va libérer la fonction NH₂ en a. A ce moment là, il sera possible de faire réagir le peptide avec le réactif de Bolton-Hunter. La réaction sera favorisée en a en se plaçant à pH 7.

Le radioligand obtenu sera de la ¹²⁵I-BH-Glu¹-NT.


- Utilisation du peptide de synthèse : la NT (2-13). Ce peptide présente exactement la mme affinité que la NT native pour ses récepteurs. Le réactif de BH pourra réagir sur la Leu² (cette réaction sera favorisée en se plaçant à pH 7).

Le radioligand obtenu sera de la ¹²⁵I-BH-NT (2-13).