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I - Théorie de la liaison d'un ligand à son récepteur :

LA LIAISON SPÉCIFIQUE :




Notion de liaison totale :

Un radioligand L* (L pour Ligand et * pour radioactif) se lie à des sites spécifiques nommés R (R pour Récepteurs) et à des sites non-spécifiques (autres protéines présentes dans le milieu d'incubation). La somme de la liaison spécifique et non-spécifique constitue la liaison totale.


Lorsque l'on réalise des expériences de saturation de la liaison, à l'équilibre, on accède à la liaison totale :


1 - La liaison totale : en présence du radioligand et après élimination du milieu et récupération des cellules, on accède à la liaison totale en comptant la radioactivité associée aux cellules.



Notion de liaison non-spécifique :

La liaison non-spécifique est déterminée en parallèle de la liaison totale, en présence d'un grand excès de ligand froid (au moins 100 fois le Kd), capable de se lier à tous les récepteurs présents. Ainsi, le radioligand ne se liera plus qu'aux sites non-spécifiques.



2 - La liaison non-spécifique : en présence du radioligand et d'un excès de ligand froid, et après élimination du milieu et récupération des cellules, on accède à la liaison non spécifique en comptant la radioactivité associée aux cellules.


Notion de liaison spécifique :

Après avoir déterminé la liaison totale d'une part, et la liaison non-spécifique d'autre part, il est facile de calculer la liaison spécifique, de la manière suivante :


Liaison totale    =    Liaison spécifique   +   Liaison non-spécifique

donc :
Liaison spécifique   =   Liaison totale   -    Liaison non-spécifique


Dans le cas des figures ci-dessus, où l'on a déterminé la liaison totale (en 1) et la liaison non spécifique (en 2), on aura :



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