Deuxième partie - Les récepteurs de la neurotensine couplés aux protéines-G :


B - Analyse comparative des données concernant les récepteurs NTSR1 et NTSR2 :


B6 - Systèmes de transduction du signal associés au NTSR1 et au NTSR2 :
La liaison de la NT au NTSR1 entraîne, de manière générale, la stimulation de la phospholipase C (PLC) par l'intermédiaire des protéines-G de type Gq. Ceci conduit à la formation d'inositols phosphates (IPs) et de diacylglycérol. Ce mode de transduction du signal a été démontré sur un grand nombre de systèmes cellulaires aussi différents que les neuroblastomes de souris N1E-115, les adénocarcinomes humains HT29 ou encore dans les cellules COS et CHO après transfection de l'ADNc codant pour le NTSR1 (pour revue, Vincent et al., 1999). Ces cascades d'évènements sont inhibées en présence de l'antagoniste non peptidique SR48692. Il a par ailleurs été montré que ce couplage aux protéines-G de type Gq se faisait au niveau de la troisième boucle intracellulaire du NTSR1 (Yamada et al., 1994). Cette production d'inositols phosphates est suivie par la mobilisation des réserves calciques de la cellule. L'élévation du calcium intracellulaire représente, suivant le type cellulaire, un second message intracellulaire qui peut entraîner l'activation de la guanylate cyclase conduisant ainsi à la formation de GMPc. La formation de GMPc dans les neuroblastomes N1E-115 est due à la libération du calcium qui se fixe à la calmoduline. Le complexe calcium-calmoduline active la NO synthétase et cette activation conduit à la formation de gaz NO (Marsault et Frelin, 1992). Ce gaz est hautement diffusible et peut alors passer les membranes cellulaires et ainsi activer une population voisine de cellules qui, bien que n'exprimant pas de récepteur de la NT, répondent de manière indirecte à la NT en produisant du GMPc (Marsault et Frelin, 1992).

La NT peut induire un couplage positif du NTSR1 à l'adénylate cyclase via une protéine-G de type Gs ce qui conduit à la formation d'AMPc (pour revue, Vincent et al., 1999). Poinot-Chazel et al. ont également montré un effet de la NT sur l'activation de la voie MAP kinases par un mécanisme dépendant de l'activation des protéines kinases C (PKC) à la fois dans les cellules humaines d'adénocarcinome de côlon HT29 et dans les cellules CHO transfectées avec l'ADNc codant pour le NTSR1 (Poinot-Chazel et al., 1996).

L'absence de modèle cellulaire exprimant le NTSR2 a rendu difficile l'étude de la transduction de ce récepteur. Le clonage des ADNc codant pour le NTSR2 a permis après expression dans des systèmes eucaryotes de mettre en évidence un certain nombre de résultats. Ainsi, la NT induit un courant chlore entrant activé par le calcium lorsque le NTSR2 de souris est exprimé dans l'ovocyte de xénope. Cependant et de manière surprenante, la lévocabastine et le SR48692 se comportent comme des agonistes du NTSR2 dans ce système particulier d'expression (Mazella et al., 1996 ; Botto et al., 1997). Ces effets de type agoniste de la lévocabastine et du SR48692 sur la mobilisation du calcium intracellulaire ont également été observés avec le NTSR2 de rat exprimé dans les cellules CHO (Yamada et al., 1998).

L'homologue humain du NTSR2 (hNTSR2) est un cas particulier puisque la NT n'induit aucune voie de transduction lorsqu'il est exprimé dans les cellules CHO. Par contre, le SR48692 et le SR142978A se comportent comme des agonistes sur le hNTSR2 en induisant la production d'IP, la mobilisation du calcium intracellulaire et l'activation de la voie des MAP kinases. Ces systèmes de transduction sont de plus, spécifiquement antagonisés par la NT et la lévocabastine (Vita et al., 1998). Une des explications possible est présentée dans le travail de Richard et al. qui montre que le hNTSR2 exprimé dans les cellules COS présente une activité constitutive sur la production d'IP. La formation d'IP est également stimulée par le SR48692 et la NT se comporte alors comme un antagoniste de la production d'IP par le SR48692 (Richard et al., 2001).

Plus récemment, Sarret et al. ont montré que la NT et la lévocabastine, contrairement au SR48692 induisaient la phosphorylation des MAP kinases dans les cellules granulaires de cervelet de rat en culture primaire qui expriment le NTSR2 de manière endogène. Cependant, aucun de ces trois composés n'est capable de stimuler la production d'IP (Sarret et al., 2002).

Ces résultats posent des questions quant à la nature agoniste de la neurotensine vis-à-vis du NTSR2. Est-ce que la NT est le ligand endogène de ce récepteur ? Un autre partenaire protéique (récepteur variant du NTSR2, NTSR3…) est-il nécessaire à la transduction du signal par la NT ? Toutes ces questions restent entières. La découverte de cellules exprimant ce sous-type de récepteur pourrait nous renseigner sur la nature agoniste, antagoniste ou agoniste inverse de la neurotensine. De même, le développement de souris invalidées pour le NTSR2 apporterait sans nul doute, de nombreuses explications sur les rôles fonctionnels de ce récepteur.