Troisième partie - La sortiline ou NTSR3, une protéine aux multiples facettes ?


L'existence d'un troisième sous-type de récepteur de la neurotensine a été mise en évidence voilà près de 15 ans au cours de la purification, par chromatographie d'affinité sur colonne de NT, d'une activité de liaison à partir de "solubilisats" de cerveaux de souris (Mazella et al., 1988 ; Mazella et al., 1989) et d'homme (Zsürger et al., 1994). La purification de cette protéine de 100 kDa et son séquençage a permis d'obtenir les 23 premiers résidus de l'extrémité amino-terminale de la protéine humaine (Zsürger et al., 1994). La protéine a également été mise en évidence au niveau des neurones de souris en culture primaire (Chabry et al., 1993).

Cette protéine d'environ 100 kDa a depuis été clonée par trois approches totalement différentes :

- En 1997, Petersen et al. ont identifié une protéine glycosylée de 95 kDa appelée gp95/sortiline sur la base de sa reconnaissance avec une protéine résidante du réticulum endoplasmique et de l'appareil de Golgi impliquée dans la maturation des récepteurs du LDL (Low Density Lipoprotein), la protéine RAP (Receptor-Associated Protein). Le gène codant pour cette protéine (sort1) se trouve sur le bras court du chromosome 1 (en 1p13-21) chez l'homme (Petersen et al., 1997).

- Dans le même temps, Lin et al. ont purifié à partir d'adipocytes de rat, une glycoprotéine de 110 kDa associée aux vésicules contenant le transporteur de glucose Glut4. Cette protéine présente 93 % d'homologie avec la sortiline, préalablement clonée par Petersen et al. (Lin et al., 1997).

- La sortiline que j'appellerai par la suite NTSR3 a également été clonée à partir d'une banque d'ADNc de cerveau humain en utilisant comme sonde, des oligonucléotides dérivés de la séquence de 23 résidus préalablement mis en évidence en 1994 par Zsürger et al. L'ADNc correspondant est totalement homologue à celui cloné par Petersen et al (Mazella et al., 1998).


1 - Distribution tissulaire du NTSR3 :
L'étude par Northern blot de l'expression des ARNm codant pour le NTSR3 à partir de nombreux tissus humains ou murins montre la présence de deux transcrits de 8 et 3,5 kb respectivement. Les ARNm du NTSR3 sont préférentiellement exprimés dans le cerveau, la moelle épinière, le cœur, les muscles squelettiques, le tissu graisseux, les testicules et, dans une moindre mesure, au niveau des reins, du foie et du côlon (Petersen et al., 1997 ; Lin et al., 1997). De plus, Lin et al. ont montré que les ARNm codant pour le NTSR3 étaient absents des adipocytes non maturés et que leur expression augmentait au cours de la différentiation adipocytaire (Lin et al., 1997).

Au niveau du système nerveux central de rat, les transcrits codant pour le NTSR3 sont principalement localisés au niveau de l'hippocampe et des cortex cingulaire, piriforme et rétrosplénial et dans une moindre mesure dans le thalamus ventral et les tubercules quadrijumeaux antérieurs (Hermans-Borgmeyer et al., 1999). Au niveau cellulaire, les ARNm codant pour le NTSR3 sont retrouvés dans des cellules gliales de rat en culture primaire (Nouel et al., 1999).

Chez la souris, le transcrit codant pour le NTSR3 est exprimé précocement (7ème jour) au cours du développement embryonnaire au niveau de l'ectoderme puis dans le tube neural (9ème au 13ème jour), suggérant une importance fonctionnelle de la protéine dans la mise en place du tissu cérébral (Hermans-Borgmeyer et al., 1999).

La localisation ultrastructurale de la protéine au niveau du système nerveux central chez le rat est en cours de réalisation dans le laboratoire du Dr. Alain Beaudet (MNI, Montréal, Canada) en utilisant des anticorps dirigés contre l'extrémité amino-terminale du NTSR3 (anticorps gracieusement fournis par le Dr. Petersen, Aarhus, Danemark). Par des techniques de marquage covalent, la protéine a été mise en évidence dans des neurones de souris en culture primaire (Chabry et al., 1993), ou encore au niveau de la rétine chez la souris (Zsürger, 2001).